生物样品中毒品检测的研究进展

摘要:毒品滥用已经成为当今日益严峻的全球问题,它给人们和社会带来了各种各样的严重危害,因此对生物样品中毒品物质的检测就变成当务之急。本文主要介绍了几种较为新颖的毒品检测技术,以及它们的研究进展。

引言

生物样品中的药物检测主要包括样品的前处理和药物检测两大部分。样品的前处理比较常见的方法可分为液液提取LLE,固相提取SPE,固相微量提取SPME,超临界流体提取SFE和免疫亲和提取AME等。而药物检测则常用气相色谱法(GC)气质联用法(GC/MS),高效液相色谱法(HPLC),GS/MS/SM测定法,和放射免疫法(RIA)等作为检测手段,现分别介绍如下:

1毒品前处理的创新之处

样品的前处理可分为液液提取(LLE),固相提取(SPE),固相微量提取(SPME,超临界流体提取(SFE)和免疫亲和提取(AME)等。

1.1 固相萃取技术的发展固相微萃取方法是一种简便,快速,需很少溶剂的预备方法。①SPME固相微萃取是在SPE的基础上结合顶空分析建立起来的一种无溶剂的萃取技术。顶空微萃取技术可以更好地应用于生物医学检验中。②膜式固相萃取。建立尿中06一乙酞吗啡的膜式固相萃取以及GC/MS/SIM定量测定的方法.用固相萃取柱萃取,以含2%(v/v)氨水的氯仿:丙醇(4:1)为洗脱液,对尿中的06一乙酞吗啡进行提取,经BSTFA衍生化后再用GC/MS/SIM测定,06一乙酞吗啡检出限可达0.004ug/mL;同一根萃取柱可连续使用。③超临界流体提取。超临界流体色谱(SFE)是常用CO作为流动相的一种新型色谱,可用于多种化合物的提取。特别是对组织样品中毒物的提取净化,具有良好的应用前景。④Sheng-Meng Wang开发了一种新奇的一步固相微萃取基础上的方法。对于甲基安非他明,吸收和衍生化作用一步完成。用二氟乙酰脯氨酰氯化物作为手性衍生试剂采用,并直接添加到样品基质中。

1.2 衍生化孟品佳考查了N甲基双三氟乙酰胺MBTF衍生化试剂对苯丙胺类毒品的衍生化效果与衍生化条件,建立该类毒品三氟乙酰化后的定性定量分析条件。王皓玉,贾娟等采用气相色谱/质谱法同时检测甲基苯丙胺、咖啡因和氯胺酮。韩胜强,刘霞等建立了尿中3,4亚甲二氧基甲基苯丙胺MDMA的五氟苯甲酰衍生化-氮磷检测气相色谱分析方法,此法较非衍生化、乙酰化、三氟乙酰化、五氟丙酰化和七氟丁酰衍生化等分析法灵敏。Hiroshi Fuji等使用一种细内径毛细管柱(5m×0.1mm I.D.),采用SIM方式对各种苯丙胺类物质的特征离子进行检测,在25-2500ng/ml得到良好的线性关系(r=0.996-0.999)。

1.3 波消化技术微波消化技术可应用于毒物毒品分子与结合蛋白的解离,最大限度的从腐败生物检材中解离出被检毒物毒品。

2检测技术的创新之处

药物检测法:①化学检测法,如放射免疫分析(RIA)、酶增强免疫分析(EMIT)、荧光偏振免疫分析(FPIA)、金标免疫层析分析(GFCA);②光谱分析法(SA);③薄层色谱分析法(TLC);④毛细管电泳(CE);⑤色谱分析法(GC,HPLC,GC/MS);⑥快速广谱药物检测系统,还有液相色谱-质谱联用技术。

2.1 用GC/MS法的创新之处孟品佳采用手性衍生化试剂: S-N-三氟乙酰-1-脯胺酰氯(TPC)和 R+-甲氧α基-三氟甲基苯乙酸(MTPA)与ATS对映体反应生成非对映体衍生化产物,通过常规的 GC/MS方法将其分离,GC/MS 采用EI+离子源。实现了Amp、MA、MDMA、MDA、MDEA、MBDB 等几种毒品对映体之间的良好分离。El?觟d Hidvégi等人在碱性条件下,以叔丁基甲醚对样品进行液-液萃取,60℃真空蒸发有机溶剂,通过联机操作注入MBTFA(甲基双苯氟醋酰胺)进行三氟乙酰化。以氘化的AP-d5 ,MA-d5 ,MDA-d5 作为内标,检测苯丙胺,甲基苯丙胺,MDMA,MDA,MDEA的检测限可达到2.5-6.9ng/mL,这四种物质在浓度5-100ng/mL的线性关系良好(>0.999)。

2.2 毛细管电泳分离(CE)孟品佳等系统研究了CE分析中各因素对常见毒品混合物分析的影响,设计确定了适用几类毒品分离分析的最佳电泳条件,对血和尿生物检材中的甲基苯丙胺、吗啡、单乙酰吗啡、可待因、海洛因等毒品进行了测定。Varesio等用该法同时分析了尿样中的苯丙胺、甲基苯丙胺、MDA、MDMA 和MDE。潘爱华,伍新尧等建立了尿样中 MDMA 及其代谢物MDA 的毛细管电泳高频电导法检测分析方法,避免了传统电导检测中电极与溶液直接接触而引起的电极中毒问题。

2.3 毒品滥用的现代分析技术GC/MS/MS和LC/MS/MS方法通常用于检测血液,头发和唾液,后者要求较少浓度的样品制备,不用分析物的衍生物来提高挥发性和分离药物的能力。

2.4太赫兹波在毒品检测方面的应用目前,国际上关于太赫兹波在毒品检测方面的研究报道很少。2005 年1月,B Fischer 等人报道了吗啡和可卡因的太赫兹吸收光谱。2005 年 8 月 ,John F Federici等人对 THz 成像在炸药、武器、毒品的安全检测上的应用进行了综述。

2.5 免疫磁珠技术的应用研究 免疫分析法是目前国际上通用的一种毒品筛选方法,其原理是利用抗原抗体反应来检测标本中的微量物质。磁珠同被检测物质相复合,在一个磁性场中起作用。磁性颗粒的磁化因此导致了震荡以偶极的形式频繁激发,创造了他们自己的场。这些场被诱导到梯度剂构造相配对的传感器中。来自与传感线圈的输出信号被放大,并且进行输出提示。磁性分析读出器提供了低量分析物的定量检测。

3结论

毒品的检测技术发展迅速,仪器检测法和免疫检测法各有所长。随着免疫磁珠技术和荧光定量检测技术的发展,免疫检测法在毒品检测中的应用将越来越广泛。

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