MDMA（3，4 亚甲基二氧甲基苯丙胺）对小鼠睾丸组织DNA 的损伤
摘要：目的用单细胞凝胶电泳试验（single cell gel electrophoresis ，SCGE）检测雄性小鼠染毒MDMA 后睾丸组织DNA 的
损伤。方法设MDMA 低、中、高三个剂量组及阴性对照组（生理盐水），灌胃染毒14 d 后，取小鼠睾丸组织，进行SCGE 试验。
结果除MDMA 低剂量组外，其他剂量组均使小鼠睾丸组织彗星细胞出现率升高，使彗星细胞迁移度增加，与阴性对照组比
较差异有统计学意义（P<0.01）；不同剂量组之间的差异也具有统计学意义（P<0.05）。结论MDMA 在本实验剂量内对小鼠睾
丸组织细胞DNA 有一定损伤作用。
MDMA（3,4-methylenedioxy-methamphetamine）,
又名3，4 亚甲基二氧甲基苯丙胺, 化学式：
C11H15NO2。小鼠经口灌胃LD50 为27．35 mg／
kg.w。MDMA 属于苯丙胺类中枢兴奋剂，是我国规
定管制的精神药品，是“摇头丸”等新型毒品的重要
成分，有强烈的兴奋和致幻作用。大剂量滥用可引
起中毒，长期滥用可导致精神障碍、行为失控、精神
病和暴力倾向，过量服用则可造成猝死［1-3］。国内外
研究表明MDMA 对人类神经系统有一定的损害
［1,4-5,7］，对人类心理和生理均有一定的影响［6,8-10］，同
时相关研究表明对MDMA 大鼠及小鼠神经及情绪
均有一定的影响作用［11-12］。但MDMA 对小鼠遗传物
质的损伤少见报道，本人为探究MDMA 对小鼠的遗
传毒性和生殖毒性，进行了一系列的相关研究。本
次试验主要通过探究MDMA 对雄性小鼠睾丸组织DNA 的损伤，从而对MDMA 的生殖毒性进行较为
全面地风险评价，同时可为临床上MDMA 对人类生
殖健康影响提供一定的参考依据。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验对象健康昆明种雄性小鼠80 只，体
重15.00～20.00 g，随机分为4 组。动物由南华大学
动物部提供。
1.1.2 受试物MDMA (样本粒重0.25 g, 纯度为
55.0 %)，来自于本市公安局禁毒中心。
1.1.3 主要试验试剂无钙、镁磷酸缓冲液(PBS)，
0.5 %正常熔点琼脂糖，1.0 %、0.5 %低熔点琼脂糖，
Triton-X 100，电泳缓冲液，碱性裂解液，中和液，碘
化丙啶等。
1.1.4 主要试验仪器低压电泳仪，隔水式电热恒
温培养箱，电子分析天平，Nikon E600 荧光显微镜，
数码显微摄像系统等。
1.2 方法
1.2.1 动物处理动物常规喂养一周后开始染毒。
MDMA 3 个剂量组分别为：低剂量组5.00 mg／kg、
中剂量组10.00 mg／kg、高剂量组20.00 mg／kg，阴
性对照组采用生理盐水，灌胃染毒，每天1 次, 灌胃
容量为0.02 ml/g，共14 d。每天观察并记录各剂量
组动物活动状况、中毒症状、死亡情况等。于第15 d
颈椎脱臼处死动物，取出睾丸，于生理盐水中洗净，
剥离被膜，制备单细胞悬液。
1.2.2 实验操作步骤采用常规SCGE［13］，实验步
骤如下：胶板制备→细胞裂解→解旋→电泳→中
和→染色→脱色→阅片。荧光显微镜下进行观察、
照相、分析，每组观察细胞数1000 个，计算彗星拖
尾率及彗星细胞迁移度，以检测DNA 的损伤。
1.3 统计学分析实验结果采用SPSS13·0 统计软
件包，彗星拖尾率采用x2 检验、彗星迁移度采用
ANOVA 进行单因素方差分析。
2 结果
各剂量组受试动物均出现不同程度中毒症状，如兴
奋、跳跃、活动剧烈、抓笼等，低剂量组症状轻微，高
剂量组最为明显。小鼠睾丸组织SCGE 彗星细胞显
微照相结果如图1-4；各组间小鼠睾丸组织细胞拖
尾率和迁移度情况见表1。
注：经x2 检验,与阴性对照组比较，* P＜0.01；中、高剂量组与低剂量组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；高剂量组与中剂量组比较，
#P＜0.05；##P＜0.01.
从表1 中得知：MDMA 中、高剂量组睾丸组织细
胞拖尾率和迁移度都明显高于阴性对照组（P<0.01），
并以高剂量组为最高。中剂量组细胞拖尾率及迁移
度与阴性对照组比较,差异有统计学意义（P<0.01）；
高剂量组细胞拖尾率及迁移度与阴性对照组比较,
差异有统计学意义（P<0.01）；各剂量组细胞拖尾率
及迁移度之间比较，差异也具有统计学意义（P<0.05），
说明MDMA 染毒在本实验剂量内对小鼠睾丸组织
细胞的DNA 有一定损伤。
3 讨论
单细胞凝胶电泳（SCGE）也称彗星试验(comet
assay)，是在单细胞水平上检测有核细胞DNA 损伤
的一种新技术。如果细胞未受损，电泳时核DNA 经
荧光染色后无拖尾现象。若细胞DNA 有损伤，电泳
时细胞DNA 断片从DNA 超螺旋结构中释放出来，
向阳极移动而产生拖尾，用荧光染料染色后在荧光
显微镜下可观察到象“彗星”状的细胞，根据“慧星”
的头部和尾部的大小和比率，从而确定细胞DNA
损伤的程度。SCGE 可以快速、灵敏地检测出DNA
损伤，在遗传毒理、环境监测和细胞凋亡等很多方
面得到了广泛的应用。本研究基于MDMA 对动物及
人类神经系统及心理、生理影响基础之上，进一步
研究MDMA 的遗传毒性［14］。从试验结果得知，小鼠
染毒14 d 后，MDMA 中、高剂量组睾丸组织细胞均
出现不同程度的DNA 损伤，说明长期服用MDMA
对小鼠遗传物质有一定的毒性效应。本研究不仅具
理论意义，也为临床上MDMA 对人类生殖健康影响
提供一定的参考依据，为MDMA 引起的相关疾病预
防与治疗提供新的思路，同时为MDMA 服用者提供
正确的生育指导。
